国际口腔医学杂志 ›› 2013, Vol. 40 ›› Issue (3): 291-296.doi: 10.7518/gjkq.2013.03.004

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血管紧张素Ⅱ对小鼠成骨细胞骨桥蛋白和基质金属蛋白酶-2表达的影响

李广悦 谢芸 岳源 白丛佳 郝亮 王敏   

  1. 口腔疾病研究国家重点实验室, 华西口腔医院修复科, 四川大学 成都 610041
  • 收稿日期:2012-04-15 修回日期:2012-11-30 出版日期:2013-05-01 发布日期:2013-05-01
  • 通讯作者: 王敏,Tel:028-85501463
  • 作者简介:李广悦(1985—),女,重庆人,博士
  • 基金资助:

    四川省科技厅科技支撑计划基金资助项目(2010SZ0065)

The effect of angiotensin Ⅱ on the expression of osteopontin and matrix metalloproteinase-2 in mice osteoblast

Li Guangyue, Xie Yun, Yue Yuan, Bai Congjia, Hao Liang, Wang Min   

  1. State Key Laboratory of Oral Diseases, Dept. of Prosthodontics, West China Hospital of Stomatology, Sichuan University, Chengdu 610041, China
  • Received:2012-04-15 Revised:2012-11-30 Online:2013-05-01 Published:2013-05-01

摘要:

目的 研究不同浓度的血管紧张素(Ang)Ⅱ对小鼠成骨细胞MC3T3-E1表达骨桥蛋白(OPN)、基质金属蛋白酶(MMP)-2浓度的影响以及AngⅡ作用受体类型。方法 体外培养小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,将不同浓度的AngⅡ作用于细胞,经过多个时间点观察收样,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测量成骨细胞表达OPN、MMP-2的浓度,用单因素方差分析上述蛋白分泌量,同时利用AngⅡ1型受体(AT1R)和2型受体(AT2R)抑制剂进行实验,确定AngⅡ产生效应的受体。结果 AngⅡ浓度在10-8~10-6 mol•L-1范围内能促进OPN、MMP-2蛋白分泌,且随着AngⅡ刺激浓度的增加,OPN、MMP-2表达量增多。在10-6 mol•L-1AngⅡ作用下OPN、MMP-2浓度变化随时间增加而增大,至24 h浓度值达最大;AT1R拮抗剂氯沙坦能明显阻断AngⅡ诱导的成骨细胞OPN及MMP-2的表达(P<0.05),而AT2R拮抗剂PD123319抑制Ang Ⅱ诱导成骨细胞表达OPN、MMP-2的效应不明显。结论 AngⅡ能通过AT1R诱导小鼠成骨细胞表达、分泌OPN及MMP-2的增加,且增加程度具有一定的时间和剂量依赖性。

关键词: 成骨细胞, 血管紧张素Ⅱ, 骨桥蛋白, 基质金属蛋白酶-2

Abstract:

Objective To analyze the effects of angiotensin(Ang)Ⅱ on the expression of osteopontin(OPN)and matrix metalloproteinase(MMP)-2 in osteoblast-like MC3T3-E1 cells and the type of receptors. Methods The mouse osteoblast -like MC3T3 -E1 cells were cultured, and divided into four groups, exposed to different concentrations of AngⅡ(10-8, 10-7, 10-6 mol•L-1) with one group as control. The secreted concentrations of OPN, MMP-2 were evaluated by enzyme-linked immunosorbent assay. In addition, the blockers of the two distinct types of receptors(AT1R and AT2R)were used to identify the receptor through which the Ang Ⅱ act in the osteoblastlike MC3T3-E1 cells. Results Ang Ⅱ, the concentration of which was within 10-8 to 10-6 mol•L-1 could increase the expressions of OPN, MMP -2 in a dose -dependent mannner. 10 -6 mol•L-1 Ang Ⅱ could stimulate the expressions of OPN, MMP-2 in a time-dependent mannner with the peak at the time of 24 h after the exposure. The AT1R blocker Losantan could significantly reduce the expressions of OPN and MMP-2 in the osteoblasts(P<0.05), while the AT2R blocker PD123319 didn’t have this effect. Conclusion Ang Ⅱ could enhance the expressions of OPN and MMP-2 in dose- and time-dependent manners via AT1R.

Key words: osteoblast, angiotensin Ⅱ, osteopontin, matrix metalloproteinase-2

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