国际口腔医学杂志 ›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (3): 268-271.doi: 10.7518/gjkq.2014.03.005

• 论著 • 上一篇    下一篇

人胚胎干细胞和诱导性多功能干细胞饲养层细胞的制备方法

谭小兵1 George T-J Huang2   

  1. 1.云南省第一人民医院 口腔内科 昆明 650032; 2.美国波士顿大学牙学院牙体牙髓病学系 波士顿 MA 02118
  • 收稿日期:2013-09-28 修回日期:2014-01-03 出版日期:2014-05-01 发布日期:2014-05-01
  • 通讯作者: George T-J Huang,教授,博士,Email:gtjhuang@bu.edu
  • 基金资助:

    国家自然科学基金地区科学基金项目(81360161)

Derivation and preparation of feeder cells for culturing human embryonic and induced pluripotent stem cells

Tan Xiaobing1, George T-J Huang2   

  1. 1. Dept. of Oral Medicine, The First People’s Hospital of Yunnan Province, Kunming 650032, China; 2. Dept. of Conservative Dentistry and Endodontics, School of Dental Medicine, Boston University, Boston MA 02118, USA
  • Received:2013-09-28 Revised:2014-01-03 Online:2014-05-01 Published:2014-05-01

摘要:

目的 建立一种能维持人胚胎干细胞(ESC)和诱导性多功能干细胞(iPSC)生长的饲养层细胞的标准制备方法。方法 选取受孕12.5~14.5 d的CF-1雌鼠,原代培养的鼠胚胎成纤维细胞(MEF)经丝裂霉素C处理后作为饲养层细胞,观察其维持人ESC和iPSC的生长情况;同时研究不同培养器具所需细胞数量,制备高质量饲养层细胞。结果 经丝裂霉素C处理后,MEF可很好维持人ESC和iPSC的生长,使其保持自我更新能力和未分化状态;控制铺板的细胞密度,可得到高质量饲养层细胞。结论 本实验得到的饲养层细胞能很好支持人ESC和iPSC生长,可作为饲养层细胞制备的标准方法使用。

关键词: 人胚胎干细胞, 人诱导性多功能干细胞, 饲养层细胞, 鼠胚胎成纤维细胞

Abstract:

Objective This study aimed to establish a standard method to derive and prepare feeder cells for the optimized growth of human embryonic stem cells(ESCs) and induced pluripotent stem cells(iPSCs). Methods CF-1 mouse fetuses between 12.5 and 14.5 days of gestation were separated, trypsinized, and cultured to derive primary mouse embryonic fibroblasts(MEFs). MEFs were then treated with mitomycin C to prepare feeder cells. The number of cells needed for high-quality feeder cells was determined through a variety of cell culture vessels. Results MEF from CF-1 pregnant mouse treated with mitomycin C could be used as feeder cells to support the culture and to maintain the undifferentiating of ESCs and iPSCs. High-quality feeder cells could be derived if an appropriate number of cells were plated. Conclusion MEF prepared in this method can optimally support and maintain the undifferentiated human ESCs and iPSCs. Furthermore, this method can be utilized as a standard method to derive feeder cells.

Key words: human embryonic stem cell, human induced pluripotent stem cell, feeder cell, mouse embryonic fibroblast

中图分类号: 

  • R 78
[1] 华成舸. 上牙槽后神经阻滞麻醉相关问题探讨[J]. 国际口腔医学杂志, 2019, 46(5): 497-502.
[2] 陈玉,姜欢,刘楠,陆晨萌,唐中元,韩茹钰,胡敏. 正畸治疗对骨性Ⅱ类错畸形患者上气道及周围结构变化的影响[J]. 国际口腔医学杂志, 2019, 46(5): 578-584.
[3] 吕娇 赵文峰. 牙周病非手术治疗的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 594-598.
[4] 杨懋彬1 曾倩2. 再生牙髓病学——牙髓再生的新方向[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 495-499.
[5] 周双双 郑欣 周学东 徐欣. 菌斑生物膜产碱代谢与龋病[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 573-577.
[6] 秦琨1 张东坡2. 不同材料烤瓷冠与金属冠磁共振成像伪影的比较[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 507-510.
[7] 陈丽娟1 孟庆飞2 万延俊1. 不同设计类型的IPS Empress铸瓷贴面前牙美学修复的疗效观察[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 511-514.
[8] 梁继超 王芬 张凤英 张正华 侯梅娟 庞富生 周锋. Digora及Propex测量根管工作长度准确性的比较研究[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 515-518.
[9] 彭艳1,2 雍翔智1 冯豆豆1,2 曾启新1 梅国城1 陶人川1,2. 口腔慢性移植物抗宿主病患者唾液T细胞相关细胞因子的表达水平[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 524-527.
[10] 陈崧 黄森元 王沛棋 章恩虹 邱昱 王剑. 公立医院与私人诊所患者对冠桥修复体的选择及满意度比较[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 528-532.
[11] 单知一 徐子卿 沈刚. 三维有限元法在舌侧正畸矫治领域中的应用[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 560-564.
[12] 孙菲1 张建刚2 肖水清2. 细胞致死性扩张毒素和外膜蛋白的结构功能和致病机制[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 565-568.
[13] 金淑芳 何悦. 穿支皮瓣在口腔颌面-头颈部缺损重建的应用进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 542-548.
[14] 徐新月1 李雪健1 任高彤1 焦凯2,3 牛丽娜3,4. 免疫细胞来源的儿茶酚胺类物质在机体代谢及炎性疾病中的作用[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 599-604.
[15] 牛学刚1 王小勇2. 天然牙与种植体联合支持修复牙列缺损的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2016, 43(5): 614-618.
Viewed
Full text


Abstract

Cited

  Shared   
  Discussed   
[1] 张京剧. 青年期至中年期颅面复合体变化的头影测量研究[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(06): .
[2] 刘玲. 镍铬合金中铍对可铸造性和陶瓷金属结合力的影响[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(06): .
[3] 王昆润. 在种植体上制作固定义齿以后下颌骨密度的动态变化[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(06): .
[4] 王昆润. 重型颌面部炎症死亡和康复病例的实验室检查指标比较[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(06): .
[5] 逄键梁. 两例外胚层发育不良儿童骨内植入种植体后牙槽骨生长情况[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(05): .
[6] 温秀杰. 氟化物对牙本质脱矿抑制作用的体外实验研究[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(05): .
[7] 杨春惠. 耳颞神经在颞颌关节周围的分布[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(04): .
[8] 王昆润. 牙周炎加重期应选用何种抗生素[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(04): .
[9] 杨儒壮 孙宏晨 欧阳喈. 纳米级高分子支架材料在组织工程中的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2004, 31(02): 126 -128 .
[10] 严超然,李龙江. 肿瘤靶向药物载体系统的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2008, 35(S1): .