国际口腔医学杂志 ›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (3): 268-271.doi: 10.7518/gjkq.2014.03.005

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人胚胎干细胞和诱导性多功能干细胞饲养层细胞的制备方法

谭小兵1 George T-J Huang2   

  1. 1.云南省第一人民医院 口腔内科 昆明 650032; 2.美国波士顿大学牙学院牙体牙髓病学系 波士顿 MA 02118
  • 收稿日期:2013-09-28 修回日期:2014-01-03 出版日期:2014-05-01 发布日期:2014-05-01
  • 通讯作者: George T-J Huang,教授,博士,Email:gtjhuang@bu.edu
  • 基金资助:

    国家自然科学基金地区科学基金项目(81360161)

Derivation and preparation of feeder cells for culturing human embryonic and induced pluripotent stem cells

Tan Xiaobing1, George T-J Huang2   

  1. 1. Dept. of Oral Medicine, The First People’s Hospital of Yunnan Province, Kunming 650032, China; 2. Dept. of Conservative Dentistry and Endodontics, School of Dental Medicine, Boston University, Boston MA 02118, USA
  • Received:2013-09-28 Revised:2014-01-03 Online:2014-05-01 Published:2014-05-01

摘要:

目的 建立一种能维持人胚胎干细胞(ESC)和诱导性多功能干细胞(iPSC)生长的饲养层细胞的标准制备方法。方法 选取受孕12.5~14.5 d的CF-1雌鼠,原代培养的鼠胚胎成纤维细胞(MEF)经丝裂霉素C处理后作为饲养层细胞,观察其维持人ESC和iPSC的生长情况;同时研究不同培养器具所需细胞数量,制备高质量饲养层细胞。结果 经丝裂霉素C处理后,MEF可很好维持人ESC和iPSC的生长,使其保持自我更新能力和未分化状态;控制铺板的细胞密度,可得到高质量饲养层细胞。结论 本实验得到的饲养层细胞能很好支持人ESC和iPSC生长,可作为饲养层细胞制备的标准方法使用。

关键词: 人胚胎干细胞, 人诱导性多功能干细胞, 饲养层细胞, 鼠胚胎成纤维细胞

Abstract:

Objective This study aimed to establish a standard method to derive and prepare feeder cells for the optimized growth of human embryonic stem cells(ESCs) and induced pluripotent stem cells(iPSCs). Methods CF-1 mouse fetuses between 12.5 and 14.5 days of gestation were separated, trypsinized, and cultured to derive primary mouse embryonic fibroblasts(MEFs). MEFs were then treated with mitomycin C to prepare feeder cells. The number of cells needed for high-quality feeder cells was determined through a variety of cell culture vessels. Results MEF from CF-1 pregnant mouse treated with mitomycin C could be used as feeder cells to support the culture and to maintain the undifferentiating of ESCs and iPSCs. High-quality feeder cells could be derived if an appropriate number of cells were plated. Conclusion MEF prepared in this method can optimally support and maintain the undifferentiated human ESCs and iPSCs. Furthermore, this method can be utilized as a standard method to derive feeder cells.

Key words: human embryonic stem cell, human induced pluripotent stem cell, feeder cell, mouse embryonic fibroblast

中图分类号: 

  • R 78
[1] 吴礼安. 部分断冠粘接术在儿童恒前牙复杂冠根折中的初步应用[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 623-631.
[2] 夏溦瑶,贾仲林. 维生素与唇腭裂发生相关性的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 632-638.
[3] 王京楠,邓淑丽. 牙根发育异常疾病概述[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 639-645.
[4] 徐书奎,张珊,谢新宇,马文盛. 上颌前方牵引矫治骨性Ⅲ类错畸形远期疗效稳定性的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 646-652.
[5] 王罗丹,范红. 蝶鞍的形态学特点及其与错畸形的关系[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 653-660.
[6] 罗晓洁,王德续,陈晓涛. 基于生物信息学分析铁死亡调控基因与牙周炎的关系[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 661-668.
[7] 孙旭,邓振南,文才,赵颖. Er: YAG激光照射种植体表面微形貌变化的扫描电子显微镜观察[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 669-673.
[8] 王素杰,谭芹,韦渊,王洁,范杰,岳二丽. 口腔扁平苔藓患者血清血管生成素-2水平与叉头翼状螺旋转录因子阳性调节性T细胞及疾病活动度的相关性分析[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 674-678.
[9] 黄元鸿,彭显,周学东. 骨碎补在治疗口腔骨相关疾病的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 679-685.
[10] 胡佳,王秀清,卢国英,黄晓晶. 再生性牙髓治疗在成人根尖发育不全恒牙应用的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 686-695.
[11] 陆磊,王鑫,康泽标,谢富强. 计算机辅助导航手术在复杂颌面部骨折中的应用新进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 696-703.
[12] 杨静,柳登高. 内镜下激光碎石术治疗唾液腺结石病的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 704-710.
[13] 柴安,雷荣昌,蒋智升,曲彬彬,郭锦材,李鹤,邵奇. 评估下颌第三磨牙拔除难度分类方法的概述[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 718-722.
[14] 杨冬叶,朱萍,吴淑仪. 舌位的影响因素及临床意义[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 723-728.
[15] 廖洪林,方仲瀚,张艳艳,刘飞,沈颉飞. 牙种植术后三叉神经创伤性神经病理性疼痛的诊断与防治[J]. 国际口腔医学杂志, 2023, 50(6): 729-738.
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[1] 王昆润. 二甲亚砜和双氯芬酸并用治疗根尖周炎[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(06): .
[2] 汤庆奋,王学侠. 17β-雌二醇对人类阴道和口腔颊粘膜的渗透性[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(06): .
[3] 潘劲松. 颈总动脉指压和颈内动脉球囊阻断试验在大脑血液动力学中的不同影响[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(05): .
[4] 王昆润. 后牙冠根斜形牙折的治疗[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(05): .
[5] 杨锦波. 嵌合体防龋疫苗的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(05): .
[6] 王昆润. 下颔骨成形术用网状钛板固定植骨块[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(04): .
[7] 汪月月,郭莉莉. 口腔机能与老化—痴呆危险因素流行病学研究[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(04): .
[8] 丁刚. 应用硬组织代用品种植体行丰颏术[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(04): .
[9] 田磊. 局部应用脂多糖后结合上皮反应性增生的变化[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(04): .
[10] 戴青. 口腔念珠菌病的新分类[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(04): .