国际口腔医学杂志 ›› 2021, Vol. 48 ›› Issue (3): 305-311.doi: 10.7518/gjkq.2021050

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尼古丁对口腔细菌单独或混合培养时菌群数目调控的研究

李诗佳(),陈秋宇,邹静,黄睿洁()   

  1. 口腔疾病研究国家重点实验室 国家口腔疾病临床医学研究中心 四川大学华西口腔医院儿童口腔科 成都 610041
  • 收稿日期:2020-09-04 修回日期:2021-01-12 出版日期:2021-05-01 发布日期:2021-05-14
  • 通讯作者: 黄睿洁
  • 作者简介:李诗佳,学士,Email: 2210647879@qq.com
  • 基金资助:
    四川大学青年教师科研启动基金(2016SCU11042);四川大学大学生创新创业训练计划项目(C2019107003)

Effect of nicotine on the growth of oral bacteria in single or mixed species

Li Shijia(),Chen Qiuyu,Zou Jing,Huang Ruijie()   

  1. State Key Laboratory of Oral Diseases & National Clinical Research Center for Oral Diseases & Dept. of Pediatric Dentistry, West China Hospital of Stomatology, Sichuan University, Chengdu 610041, China
  • Received:2020-09-04 Revised:2021-01-12 Online:2021-05-01 Published:2021-05-14
  • Contact: Ruijie Huang
  • Supported by:
    Research Initiation Fund for Young Teachers of Sichuan University(2016SCU11042);Undergraduate Innovation and Entrepreneurship Training Program of Sichuan University(C2019107003)

摘要:

目的 探讨尼古丁对口腔细菌单独培养和混合培养中各菌群数量的调控作用。方法 将变异链球菌、格氏链球菌、缓症链球菌、口腔链球菌、唾液链球菌、血链球菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、干酪乳杆菌、表皮葡萄球菌10种口腔细菌单独或混合后置于不同质量浓度的尼古丁下培养,检测浮游状态的细菌和生物膜内的细菌各菌群数量的改变,评估尼古丁对不同状态下细菌数目的调控。结果 大部分口腔细菌单独培养时,尼古丁对其生长有一定的促进作用。而细菌混合培养时,尼古丁和其他细菌的存在均可影响细菌的生长,其中,致龋菌变异链球菌的生长明显更加活跃。结论 尼古丁致口腔菌群朝利于致龋菌群生长的方向改变,进而增加了吸烟者的龋风险。

关键词: 尼古丁, 口腔微生物, 浮游细菌, 生物膜细菌, 微生态

Abstract:

Objective This work aims to investigate the effect of nicotine on the growth of oral bacteria in single or mixed species. Methods Ten oral bacterial species, Streptococcus mutans, Streptococcus gordonii, Streptococcus mitis, Streptococcus oralis, Streptococcus salivarius, Streptococcus sanguinis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Lactobacillus casei, and Staphylococcus epidermidis, were grown in single or mixed species in the presence of different concentrations of nicotine. The number of bacteria in planktonic state and biofilm state was calculated and used to evaluate the regulation of nicotine on bacterial growth. Results In the most cases of the single-species model, nicotine promotes bacterial growth. However, in the mixed-species model, the nicotine and the presence of other bacteria regulate bacterial growth. The growth of cariogenic bacteria, such as Streptococcus mutans, is significantly more active than that of other bacteria. Conclusion Nicotine increases the caries risk of smokers by shifting the oral flora in favor of caries.

Key words: nicotine, oral microorganism, planktonic bacteria, biofilm bacteria, microbial ecology

中图分类号: 

  • R780.2

表 1

10种细菌的特异性引物"

细菌 序列(5’—3’) 模板链
变异链球菌 正向引物 AGTCGTGTTGGTTCAACGGA
反向引物 TAAACCGGGAGCTTGATCGG
格氏链球菌 正向引物 GCCTTAATAGCACCGCCACT
反向引物 CCATCTCTGTTGTTAGGGCGT
缓症链球菌 正向引物 CATCTCACGGGTTGAAGCCT
反向引物 CCTCGCAGACTAAATTCGCC
口腔链球菌 正向引物 GGCCGTGAGAATGTGATTGC
反向引物 TGTTACAGCCTGACCACCAC
唾液链球菌 正向引物 CTGCTCTTGTGACAGCCCAT
反向引物 ACGGGAAGCTGATCTTTCGTA
血链球菌 正向引物 TCAGCAAATCCCCCAGGTTC
反向引物 AACGGAGTGTCAGCGAAGTT
金黄色葡萄球菌 正向引物 TCAGATGAGCAAGCTTCACCAA
反向引物 TGGCTGTACTGCTGCTATACG
粪肠球菌 正向引物 CGCGAACATTTGATGTGGCT
反向引物 GTTGATCCGTCCGCTTGGTA
干酪乳杆菌 正向引物 AAGAAAGGCTCACTGGTCGG
反向引物 TTTTGGCCCGGATTCGATGA
表皮葡萄球菌 正向引物 CATATGGACCTGCACCCCAA
反向引用 GCAACTGCTCAACCGAGAAC

图 1

10种细菌单独浮游培养24 h后的生长情况 A:变异链球菌;B:格氏链球菌;C:缓症链球菌;D:口腔链球菌;E:唾液链球菌;F:血链球菌;G:金黄色葡萄球菌;H:粪肠球菌;I:干酪乳杆菌;J:表皮葡萄球菌。与0 mg·mL-1尼古丁对照组相比,*为P<0.05,**为P<0.01。"

图 2

10种细菌混合浮游培养24 h后的生长情况 A:变异链球菌;B:格氏链球菌;C:缓症链球菌;D:口腔链球菌;E:唾液链球菌;F:血链球菌;G:金黄色葡萄球菌;H:粪肠球菌;I:干酪乳杆菌;J:表皮葡萄球菌。与0 mg·mL-1尼古丁对照组相比,*为P<0.05,**为P<0.01。"

图 3

经不同质量浓度尼古丁处理的10种细菌混合浮游细胞培养24 h后数量的占比情况 A:0 mg·mL-1;B:2 mg·mL-1;C:4 mg·mL-1。"

图 4

10种细菌单独培养24 h后生物膜的形成情况 A:变异链球菌;B:格氏链球菌;C:缓症链球菌;D:口腔链球菌;E:唾液链球菌;F:血链球菌;G:金黄色葡萄球菌;H:粪肠球菌;I:干酪乳杆菌;J:表皮葡萄球菌。与0 mg·mL-1尼古丁对照组相比,*为P<0.05,**为P<0.01。"

图5

10种细菌混合培养24 h后生物膜的形成情况 A:变异链球菌;B:格氏链球菌;C:缓症链球菌;D:口腔链球菌;E:唾液链球菌;F:血链球菌;G:金黄色葡萄球菌;H:粪肠球菌;I:干酪乳杆菌;J:表皮葡萄球菌。与0 mg·mL-1尼古丁对照组相比,*为P<0.05,**为P<0.01。"

图 6

经不同质量浓度尼古丁处理的10种细菌混合培养24 h后生物膜的占比情况 A:0 mg·mL-1;B:2 mg·mL-1;C:4 mg·mL-1。"

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