乙肝病毒X 蛋白诱导细胞凋亡的研究

摘要/Abstract

摘要： 目的探讨乙肝病毒X 蛋白在诱导细胞凋亡中的作用。方法用基因重组的方法构建乙肝病毒X
（HBX）真核表达载体，脂质体转染体外培养的正常小鼠胎肝细胞（FL）、人肝癌细胞（SMMC- 7721）和人宫颈癌细胞（Hela）；用免疫组化染色法检查HBX 基因的表达；用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记法及流式细胞术检测细胞凋亡。结果成功构建X 基因真核表达载体，经免疫组化检测，重组载体pcDNA3- X 均可在以上3 种不同类型细胞中表达，并能诱导Hela 细胞凋亡。结论 HBX 能诱导细胞凋亡，获得稳定表达HBX蛋白的Hela 细胞株，经传代20 代仍然稳定表达HBX 蛋白。

关键词: 乙肝病毒X 蛋白, 聚合酶链反应, 真核表达载体, 细胞凋亡

Abstract: Objective To investigate the role of hepatitis B virus X（HBX） protein in cell apoptosis. Methods Eukaryotic expression vector of HBX gene was constructed. Recombination vector mentioned above was transfected by Lipofectamine to Hela cell, Hepatocarcinoma cell（SMMC- 7721） and normal mouse fetal liver cell（FL）. X protein（pX） expressed in these three cell type was detected by immunohistochemical method. The apoptosis in Hela- X cells was analyzed by flow cytometry and the terminal deoxynucleotidyl transferase mediated deoxyuridine triphosphate fluorescence nick end labeling（TUNEL）method. Results In three cell type, pX expressed. A stable pX- expression cell line was selected by G418. HBX protein could express in Hela cells in 20 passages. Conclusion HBX protein could induce apoptosis in vitro.

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