%A 张誉泓,戚孟春,董伟,孙红 %T CaMKi>Ⅱδ基因沉默对破骨细胞分化功能及c-fosi>/c-juni>/CREBi>基因的影响 %0 Journal Article %D 2019 %J 国际口腔医学杂志 %R 10.7518/gjkq.2019048 %P 420-425 %V 46 %N 4 %U {https://www.gjkqyxzz.cn/CN/abstract/article_13554.shtml} %8 2019-07-01 %X

目的 探索编码钙调蛋白依赖性激酶(CaMK)Ⅱδ的基因沉默对破骨细胞分化功能的影响以及c-fosc-junCREB基因在CaMKⅡδ调控破骨细胞分化中的作用,以揭示破骨细胞分化调控的分子机制。方法 构建CaMKⅡδ RNA干扰载体,转染至小鼠RAW264.7细胞,确定干扰效率。病毒转染细胞后,用50 ng·mL -1核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导,5 d后收获,通过耐酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测、牛骨吸收陷窝检测沉默CaMKⅡδ基因对破骨细胞分化、骨吸收功能的影响;48 h后收获,利用实时聚合酶链式反应(PCR)、Western-blot等方法检测c-fosc-junCREB的表达情况。 结果 CaMKⅡδ RNA干扰在mRNA和蛋白质水平的干扰效率分别为70.6%和72.2%。 CaMKⅡδ RNA干扰可显著降低 c-fosc-junCREB的mRNA水平,下调幅度分别为74%、49% 和24%,CaMKⅡδ RNA干扰可显著降低c-Fos、c-Jun和CREB的水平,下调幅度分别为74.3%、61.3%和59.2%。结论 CaMKⅡδ RNA干扰可在mRNA和蛋白质水平显著抑制c-fosc-junCREB的表达,其共同参与CaMKⅡδ对破骨细胞分化的调控。