国际口腔医学杂志

国际口腔医学杂志 ›› 2013, Vol. 40 ›› Issue (5): 588-591.doi: 10.7518/gjkq.2013.05.009

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壳聚糖季铵盐对人牙周膜成纤维细胞增殖及细胞周期影响的实验研究

吉秋霞 袁昌青 宋文斌 武宏   

  1. 青岛大学医学院附属医院口腔科 青岛 266003
  • 收稿日期:2012-12-12 修回日期:2013-03-24 出版日期:2013-09-01 发布日期:2013-09-01
  • 通讯作者: 吉秋霞，Tel：0532-82912065
  • 作者简介:吉秋霞（1975—），女，山东人，副教授，博士
  • 基金资助:

    山东省优秀中青年科学家奖励基金资助项目（BS2010CL015）

Effects of quaternized chitosan on the cell proliferation and cell cycle of human periodontal ligament cells

Ji Qiuxia, Yuan Changqing, Song Wenbin, Wu Hong.   

  1. Dept. of Stomatology, The Affiliated Hospital of Medical College, Qingdao University, Qingdao 266003, China
  • Received:2012-12-12 Revised:2013-03-24 Online:2013-09-01 Published:2013-09-01

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摘要：

目的 观察不同浓度壳聚糖季铵盐（HTCC）对人牙周膜成纤维细胞（HPDLC）增殖和细胞周期的影响，并与壳聚糖（CS）相比较，为HTCC的合理应用提供依据。方法 原代培养人牙周膜成纤维细胞，免疫组织化学鉴定细胞来源。四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定质量浓度分别为2 000、1 000、100、50、10、3、1.5、1、0.5 和0.2 mg•L-1的HTCC和CS对HPDLC 培养1、3、5 d细胞增殖活性的影响；流式细胞术测定质量浓度为3 g•L-1和 3 mg•L-1的HTCC和CS及1 g•L-1的HTCC对HPDLC细胞周期的影响。应用SSPS 13.0软件包对数据进行统计学分析。结果 经免疫组织化学显示：培养的细胞波形丝蛋白染色阳性，角蛋白染色阴性，证明细胞来源于外胚层。MTT 实验表明，与对照组相比，HTCC在质量浓度为2 000、1 000、100和50 mg•L-1时，光密度（OD）值降低；质量浓度为10、3、1.5、1、0.5 和0.2 mg•L-1时，OD值增高。而CS在所有实验质量浓度范围内均能促进细胞的增殖，在相对高质量浓度培养5 d 后对HPDLC的促增殖作用与对照组的差异具有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术实验结果表明，3和1 g•L-1的HTCC可诱导细胞凋亡。质量浓度为3 g•L-1和3 mg•L-1的CS使S%降低，G2%上升，其差异具有统计学意义（P<0.01）。结论 质量浓度为50~2 000 mg•L-1的HTCC抑制HPDLC的增殖，3和1 g•L-1的HTCC诱导细胞凋亡，显示出明显的细胞毒性；质量浓度为0.2~10 mg•L-1的HTCC明显促进了HPDLC增殖。HTCC和CS可通过改变细胞周期影响细胞增殖。

关键词: 壳聚糖, 牙周膜成纤维细胞, 细胞增殖, 细胞周期

Abstract:

Objective To evaluate the effects of quaternized chitosan[N-(2-hydroxy-3-trimethylammonium) propylchitosan chloride] (HTCC) on the proliferation and cell cycle activities of human periodontal ligament cells(HPDLCs) with different concentrations compared with chitosan(CS). Investigating the mechanisms underlying the use of HTCC is necessary. Methods Primary cells were isolated from human periodontal ligament. HPDLCs were cultured and characterized by immunocytochemistry. The effect of varying concentrations(2 000, 1 000, 100, 50, 10, 3, 1.5, 1, 0.5, and 0.2 mg•L-1) of HTCC and CS on HPDLCs were evaluated by methyl thiazolyl tetrazolium(MTT) assay. Flow cytometry (FCM) was used to determine the cell cycle states of HPDLCs with HTCC(3 g•L-1, 1 g•L-1, and 3 mg•L-1) and CS(3 g•L-1 and 3 mg•L-1). The SPSS 13.0 software package was used for statistical analysis. Results Immunocytochemistry results show that the cells stained positively to antibodies against vimentin and stained negatively to antibodies against cytokeratin, indicating that the cells were external embryo mesenchymal cells. The MTT assay showed decreased optical density(OD) values of HTCC at concentrations of 2 000, 1 000, 100, and 50 mg•L-1 and increased OD values at concentrations of 10, 3, 1.5, 1, 0.5, and 0.2 mg•L-1. CS accelerated the proliferation of HPDLC at all tested concentrations. Compared with the control, a significant difference was observed at 5 d(P<0.01). FCM results revealed that HTCC at 3 g•L-1 and 1 g•L-1 induced apoptosis, whereas CS at 3 g•L-1 and 3 mg•L-1 induced a decrease in S% and increase in G2%. A significant difference(P<0.01) was observed compared with the control. Conclusion HTCC and CS affected the proliferation of HPDLCs by changing the cell cycle. HTCC at concentrations of 50 mg•L-1 to 2 000 mg•L-1 inhibited the proliferation of HPDLCs and exhibited strong cytotoxicity. HTCC at concentrations of 0.2 mg•L-1 to 10 mg•L-1 stimulated the proliferation of HPDLCs. Different cytobiological effects of HTCC and CS on cell cycle were observed.

Key words: chitosan, human periodontal ligment cell, cell proliferation, cell cycle

[1] 刘娟,陈斌,闫福华. 富血小板血浆和浓缩生长因子对人牙周膜细胞增殖和成骨分化影响的研究[J]. 国际口腔医学杂志, 2021, 48(5): 520-527.
[2] 邹俊东,刘定坤,杨楠,王谜,刘志辉. 生物活性玻璃/壳聚糖复合材料在生物医学领域的应用[J]. 国际口腔医学杂志, 2020, 47(1): 90-94.
[3] 杨宇轩,张海霞,王爽. 釉原蛋白在牙周组织再生中的生物学作用[J]. 国际口腔医学杂志, 2019, 46(2): 191-196.
[4] 李媛媛,程斌,王韵. 长链非编码RNA lnc-p26090对口腔鳞状细胞癌细胞糖酵解及增殖的影响[J]. 国际口腔医学杂志, 2018, 45(6): 628-634.
[5] 王志强,刘娅丽,马丽娟,杨兰,王若宇,高舒婷. 红景天苷对人舌鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖、凋亡、周期及迁移的影响[J]. 国际口腔医学杂志, 2018, 45(6): 678-685.
[6] 金鑫, 杨军星, 王英男, 刘志辉, 王博蔚. 海藻酸-壳聚糖微球的制备及其在生物医药领域的应用[J]. 国际口腔医学杂志, 2018, 45(4): 414-419.
[7] 詹烨明, 张明珠. 药物性牙龈增生与细胞增殖和凋亡相关性的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2018, 45(2): 199-203.
[8] 夏佳佳1 王岚2 章燕珍3. 高浓度葡萄糖对人牙周膜成纤维细胞成骨分化能力的影响[J]. 国际口腔医学杂志, 2015, 42(4): 415-419.
[9] 孟耀 刘曼 白丁. 牙周膜肌成纤维细胞的体外培养及其标志物的表达时效[J]. 国际口腔医学杂志, 2015, 42(3): 285-289.
[10] 程群，杨明华，陈斌，刘娟，闫福华. Er:YAG激光对人牙周膜细胞增殖和迁移的影响[J]. 国际口腔医学杂志, 2015, 42(2): 135-139.
[11] 刘俊超，潘亚萍. 细胞周期依赖性激酶抑制蛋白和激酶抑制蛋白及其与口腔疾病[J]. 国际口腔医学杂志, 2014, 41(6): 712-715.
[12] 张林1 陈扬熙2 陈雨雪2. 两种方法原代培养人Malassez上皮剩余细胞[J]. 国际口腔医学杂志, 2014, 41(1): 40-44.
[13] 姜竹玲1 王祥1综述张斌1 关呈超1 高睿2审校. 人牙周膜成纤维细胞体外培养的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2012, 39(5): 601-603.
[14] 刘唯佳综述 朱恩新 刘婷姣审校. A870G 的多态性与肿瘤发生发展的相关性[J]. 国际口腔医学杂志, 2012, 39(1): 93-96.
[15] 姚洋1 班兆阳1综述 宫苹2审校. 可注射智能壳聚糖水凝胶的研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2011, 38(5): 554-558.
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[1] 张新春. 桩冠修复与无髓牙的保护[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(06): .
[2] 王昆润. 长期单侧鼻呼吸对头颅发育有不利影响[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(05): .
[3] 彭国光. 颈淋巴清扫术中颈交感神经干的解剖变异[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(05): .
[4] 杨凯. 淋巴化疗的药物运载系统及其应用现状[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(05): .
[5] 康非吾. 种植义齿下部结构生物力学研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(05): .
[6] 柴枫. 可摘局部义齿用Co-Cr合金的激光焊接[J]. 国际口腔医学杂志, 1999, 26(04): .
[7] 孟姝,吴亚菲,杨禾. 伴放线放线杆菌产生的细胞致死膨胀毒素及其与牙周病的关系[J]. 国际口腔医学杂志, 2005, 32(06): 458 -460 .
[8] 费晓露,丁一,徐屹. 牙周可疑致病菌对口腔黏膜上皮的粘附和侵入[J]. 国际口腔医学杂志, 2005, 32(06): 452 -454 .
[9] 赵兴福,黄晓晶. 变形链球菌蛋白组学研究进展[J]. 国际口腔医学杂志, 2008, 35(S1): .
[10] 庞莉苹,姚江武. 抛光和上釉对陶瓷表面粗糙度、挠曲强度及磨损性能的影响[J]. 国际口腔医学杂志, 2008, 35(S1): .