国际口腔医学杂志 ›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (1): 40-44.doi: 10.7518/gjkq.2014.01.010

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两种方法原代培养人Malassez上皮剩余细胞

张林1 陈扬熙2 陈雨雪2   

  1. 1.重庆医科大学附属口腔医院,口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室 重庆 401147; 2.口腔疾病研究国家重点实验室 华西口腔医院正畸科(四川大学) 成都 610041
  • 收稿日期:2013-09-11 修回日期:2013-11-11 出版日期:2014-01-01 发布日期:2014-01-01
  • 通讯作者: 陈雨雪,主治医师,博士,Email:yuxuechen@gmail.com
  • 作者简介:张林,住院医师,博士,Email:zhanglinfine@126.com
  • 基金资助:

    国家自然科学基金(30801316)

Primary culture of human epithelial cell rests of Malassez using two methods

Zhang Lin1, Chen Yangxi2, Chen Yuxue2.   

  1. 1. The Affiliated Hospital of Stomatology, Chongqing Medical University, Chongqing Key Laboratory for Oral Diseases and Biomedical Sciences, Chongqing 401147, China; 2. State Key Laboratory of Oral Diseases, Dept. of Orthodontics, West China Hospital of Stomatology, Sichuan University, Chengdu 610041, China
  • Received:2013-09-11 Revised:2013-11-11 Online:2014-01-01 Published:2014-01-01

摘要:

目的 探索较容易的、成功率较高的人Malassez上皮剩余细胞体外培养方法。方法 取104例正常恒牙牙周膜组织,随机分为2组,分别采用组织块结合无血清培养法、酶消化结合无血清培养法进行原代培养并传代。在倒置显微镜下观察细胞生长情况以及细胞形态,采用免疫组织化学鉴定波形蛋白与角蛋白。结果 采用组织块结合无血清培养法、酶消化结合无血清法都可以成功进行Malassez上皮剩余细胞(ERM)的体外培养,其中采用组织块法,在发现上皮岛后机械刮除牙周膜成纤维细胞,再换用无血清培养基较易获得该细胞。结论 本研究成功进行了人ERM的原代培养、分离和鉴定,为进一步探索更好的体外培养人ERM方法提供依据。

关键词: Malassez上皮剩余细胞, 牙周膜成纤维细胞, 组织块法, 酶消化法

Abstract:

Objective To explore an easier culturing method for human epithelial cell rests of Malassez(ERM) in vitro. Methods Tissues of periodontal ligament isolated from 104 normal human permanent teeth were collected and divided randomly into two groups, and then primarily cultured using tissue explant combination with serum-free culture and enzymatic digestion combination with serum-free culture. Cell growth and morphology were observed under an inverted microscope. Vimentin and keratin were identified by immunohistochemistry. Results Both culturing methods, including tissue explant combination with serum-free culture and enzyme digestion combination with serum-free culture, can successfully culture ERM in vitro. In the tissue explant method, obtaining ERM by mechanical curettage of periodontal ligament fibroblasts and changing to serum-free medium when the epithelial island was found are easier. Conclusion Primary human ERM was successfully isolated, cultured, and identified, which provided basis for development of better culturing methods of human ERM in vitro.

Key words: epithelial cells of Malassez, periodontal ligament fibroblasts, tissue explant, enzymatic digestion

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